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液相色譜常見問題及處理辦法
更新時間:2011-04-02   點擊次數(shù):2030次

問:用HPLC進行分析時保留時間有時發(fā)生漂移,有時發(fā)生快速變化,原因何在?如何解決?

答:關于漂移問題:

1. 溫度控制不好,解決方法是采用恒溫裝置,保持柱溫恒定

2. 流動相發(fā)生變化,解決辦法是防止流動相發(fā)生蒸發(fā)、反應等

3. 柱子未平衡好,需對柱子進行更長時間的平衡

關于快速變化問題

1. 流速發(fā)生變化,解決辦法是重新設定流速,使之保持穩(wěn)定

2. 泵中有氣泡,可通過排氣等操作將氣泡趕出。

3. 流動相不合適,解決辦法為改換流動相或使流動相在控制室內(nèi)進行適當混合

問: 色質聯(lián)用中毛細柱的選擇應注意什么問題?

答: 1. 柱效要高

2. 熱穩(wěn)定性好

3. 化學惰性強

具體選擇應注意

1. 柱極性。根據(jù)分析樣品選擇不同極性的柱子進行分析

2. 柱子內(nèi)徑。內(nèi)徑大小決定柱容量

3. 液膜厚度。分析樣品溫度不一樣,對膜厚有不同要求,溫度高液膜要厚,溫度低液膜要薄

4. 柱長度。柱越長,柱效越高,分離效果越好,但也存在吸附問題,柱子過長,分析時間長,因此要根據(jù)樣品考慮柱子長度

5. 外涂層(柱體)的選擇。

6. 另外還有儀器型號、分析對象等因素

問:液相色譜中峰出現(xiàn)拖尾或出現(xiàn)雙峰的原因是什么?

答: 1. 篩板堵塞或柱失效,解決辦法是反向沖洗柱子,替換篩板或更換柱子。

2. 存在干擾峰,解決辦法為使用較長的柱子,改換流動相或更換選擇性好的柱子

問:從那些方面可以簡單判別毛細管柱子的熱穩(wěn)定性好壞?

答: 1. 分配容量(或容量因子)K,好的柱子在高溫運行后,分配容量K不應有明顯的下降,否則,說明柱子的熱穩(wěn)定性不好

2. 理論塔板數(shù)n,熱穩(wěn)定性好的柱子經(jīng)受高溫后,理論塔板數(shù)應基本保持恒定

3. 柱子的極性。熱穩(wěn)定性好的柱子,高溫前后極性變化不大,具體表現(xiàn)為保留指數(shù)I值沒有大的變化。

4. 噪聲。熱穩(wěn)定性好的柱子在高溫下使用后,噪聲不能增加。

5. 柱子的去活層,毛細管柱子涂固定液前內(nèi)部一般要用去活性試劑去活以增加惰性。質量好的毛細管柱子高溫后,去活層不應該變化,表現(xiàn)在對強極性樣品或酸堿性樣品的吸附性不能增加。

問:為什么進樣器內(nèi)的玻璃襯套會對色譜行為造成影響?

答:進樣器內(nèi)的玻璃襯套主要有下列作用:

1. 提供一個溫度均勻的汽化室,防止局部過熱。

2. 玻璃的惰性不不銹鋼好,減少了在汽化期間樣品分解的可能性。

3. 易于拆換清洗,以保持清潔的汽化室表面,一些痕量非揮發(fā)性組分會逐漸積累殘存于汽化室,高溫下會慢慢分解,使基流增加,噪聲增大,通過清洗玻璃襯套可以消除這種影響。

4. 可根據(jù)需要選擇管壁厚度及內(nèi)徑適宜的玻璃襯套,以改變汽化室的體積,而不用更換整個進樣加熱塊。

從以上幾個方面可以知道玻璃襯套對色譜行為造成影響的原因。

問:毛細管色譜分流進樣時,非線性分流的主要原因是什么?name=\"6\">

答:1. 進樣器溫度太低,樣品汽化不*,發(fā)生分級分流。

 

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